油乳劑疫苗是以礦物油為佐劑與滅活后的抗原液混合乳化制成，即是將一種液體或粉末微粒（分散相或內(nèi)相）借助乳化劑、機(jī)械力的作用，分散懸浮于另一種不相溶的液體（連續(xù)相或外相）中，從而形成穩(wěn)定的分散體系。當(dāng)以水相為分散相，以加有乳化劑的油相為連續(xù)相時(shí)，制成的油乳劑為油包水型(W/0)，其以佐劑活性優(yōu)良，為生物制品所采用的主要?jiǎng)┬?，此劑型疫苗具有吸收緩慢、免疫刺激持續(xù)和免疫保護(hù)期長(zhǎng)等特點(diǎn)，在獸用疫苗方面具有廣泛應(yīng)用前景。

但通常來(lái)說(shuō)，W/0型油乳劑疫苗相對(duì)黏稠，在機(jī)體內(nèi)不易分散，而黏度是油乳劑疫苗成品檢驗(yàn)物理性狀中的一項(xiàng)重要指標(biāo)。疫苗的黏度偏大，給臨床獸醫(yī)人員注射疫苗造成很大困難，使靶動(dòng)物的應(yīng)激反應(yīng)大且機(jī)體難以吸收，故油乳劑的黏度可直接影響到疫苗的使用和免疫效果，影響到疫苗的產(chǎn)品質(zhì)量，為了降低油乳劑疫苗黏度從而使疫苗達(dá)到方便使用，且減少其使用過(guò)程中的副反應(yīng)，本文主要從制備油乳劑疫苗中的硬脂酸鋁、乳化劑、油/水相比與乳化工藝等方面探討影響油乳劑疫苗黏度與穩(wěn)定性的因素。

1、適量的硬脂酸鋁

硬脂酸鋁在油乳劑中是一種助懸劑，是影響油乳劑疫苗黏度的一個(gè)重要因素，加入適量可減少液珠的沉降，增強(qiáng)油乳劑的內(nèi)相黏度，降低液珠之間的碰撞幾率，最終可增加油乳劑疫苗的穩(wěn)定性，但是，在同一油/水相比情況下,隨著硬脂酸鋁含量的增加，其黏度有升高的趨勢(shì)。

當(dāng)油/水相比的大小較高時(shí)，隨著硬脂酸鋁含量的加大，其黏度有增加的趨勢(shì)，此時(shí)低含量硬脂酸鋁是有利于降低油乳劑的黏度，但會(huì)出現(xiàn)分層現(xiàn)象，影響油乳劑的穩(wěn)定性；相反，當(dāng)油/水相比的大小較低時(shí),隨著硬脂酸鋁含量的加大，其黏度同樣存在增加的趨勢(shì)，此時(shí)高含量硬脂酸鋁會(huì)使油乳劑的黏度出現(xiàn)過(guò)高現(xiàn)象而不符合《規(guī)程》的規(guī)定，據(jù)有關(guān)資料報(bào)道，當(dāng)油/水相比分別為3:1、2:1和1:1時(shí)，相應(yīng)油相中適量的硬脂酸鋁含量應(yīng)分別為2%、1%與0.5%，此時(shí)制備的油乳劑疫苗的黏度、穩(wěn)定性均達(dá)到《規(guī)程》的質(zhì)量要求。這說(shuō)明隨著油/水相比的大小降低，油相中硬脂酸鋁含量相應(yīng)降低，呈正比例關(guān)系。

2、采用混合的乳化劑

要獲得優(yōu)良的油乳劑疫苗，應(yīng)將滅活抗原高度分散于白油中，就要使油與水的界面張力降低。乳化劑的一個(gè)主要功能就是降低界面張力，從而使水相充分分散于油相之中。

在加有乳化劑油/水相體系中，經(jīng)過(guò)機(jī)械力作用，界面張力降低，同時(shí)界面發(fā)生吸附，形成界面膜，界面膜具有一定強(qiáng)度，對(duì)分散相液珠具有保護(hù)作用，使得液珠在相互碰撞時(shí)不易聚結(jié)。研究發(fā)現(xiàn)，單一、純凈的乳化劑所形成的界面吸附膜的膜排列不夠緊密，膜強(qiáng)度不高。而混合的乳化劑，以及混有雜質(zhì)的乳化劑，則比單一、純凈的膜強(qiáng)度大為提高，表面吸附分子排列緊密。一般認(rèn)為，在混合乳化劑使用后，界面上有“復(fù)合物”生成，膜的強(qiáng)度增加，表面張力降至極低值且不易破裂，因此液珠不易聚結(jié)，油乳劑更具有穩(wěn)定性。

以Span-80與Tween-80組成的混合乳化劑在獸用油乳劑疫苗中得到了廣泛的使用，其混合HLB值（親水親油平衡值）成為制備穩(wěn)定油乳劑的重要參數(shù)，且調(diào)整主要利用Span-80與Tween-80的配比來(lái)進(jìn)行。具有良好免疫效果的油乳劑多為W/0型，這需要調(diào)整HLB值以達(dá)到制取穩(wěn)定油乳劑目的，一般HLB值應(yīng)小于8。

3、恰當(dāng)?shù)挠?水相比

油乳劑黏度影響油乳劑疫苗的穩(wěn)定性，黏度越大，則分散相液珠運(yùn)動(dòng)速度越慢有利于油乳劑的穩(wěn)定，但是，高黏度不利于機(jī)體免疫，而低黏度容易造成油乳劑不穩(wěn)定，因此油/水相比的大小有一定范圍。

如欲降低油乳劑的黏度，可以增加油相的比例，例如以油/水相比為2:1、3:1，最高可達(dá)4:1時(shí)，亦能獲得良好的W/0型油乳劑疫苗，但是隨著油/水相比的升高，除了前面所提到為了制備的油乳劑疫苗的黏度、穩(wěn)定性均達(dá)到《規(guī)程》的質(zhì)量要求，導(dǎo)致硬脂酸鋁用量需相應(yīng)提高外，還有重要一點(diǎn)，即此時(shí)制備的油乳劑疫苗中的單位抗原含量偏低，為達(dá)到免疫效果，則不得不增大注射劑量或增加免疫次數(shù)，增加臨床獸醫(yī)人員工作強(qiáng)度，再者如需提高每種抗原滴度，雖可以通過(guò)濃縮等方式增加單位體積抗原滴度，但在制苗過(guò)程增加工藝程序以致可能會(huì)增加污染機(jī)會(huì)。相反，油/水相比的大小較低時(shí)，硬脂酸鋁用量相應(yīng)減小，但是生產(chǎn)油乳劑疫苗時(shí)需要大量的抗原，增大了生產(chǎn)成本。所以在恰當(dāng)油/水相比下，制備的油乳劑疫苗不但穩(wěn)定性良好、黏度低及均達(dá)到《規(guī)程》的質(zhì)量要求，而且疫苗中抗原含量適中，生產(chǎn)成本適宜。

4、適當(dāng)?shù)娜榛潭扰c時(shí)間

乳化機(jī)乳化速率對(duì)油乳劑疫苗穩(wěn)定性的影響極大。分散相在強(qiáng)大機(jī)械力的作用下分散越來(lái)越均勻，形成的油乳劑顆粒越均勻細(xì)密，故疫苗就越穩(wěn)定。但當(dāng)乳化速率達(dá)到一定程度后繼續(xù)增大強(qiáng)度，疫苗的穩(wěn)定性提高較小，顆粒之間碰撞較多，容易分層導(dǎo)致破乳。再者，高速剪切攪拌對(duì)于油/水相體系產(chǎn)熱明顯，大量的機(jī)械能被轉(zhuǎn)化為熱能的形式，而熱能會(huì)對(duì)水相中的抗原蛋白產(chǎn)生不利影響。

同樣，油水兩相經(jīng)強(qiáng)烈攪拌乳化形成比較穩(wěn)定的油乳劑疫苗需要一定時(shí)間。隨著攪拌乳化時(shí)間的增加，疫苗的穩(wěn)定性相應(yīng)增加，但超出一定時(shí)間后，油乳劑中的液珠可能因?yàn)橄嗷ヅ鲎埠碗x心沉降的作用有聚結(jié)的趨勢(shì)，影響了疫苗的穩(wěn)定性。一般來(lái)說(shuō)，乳化時(shí)從加完水相計(jì)起，8000－10000rpm，乳化5－6min為佳。

5、白油的品質(zhì)

制備油乳劑疫苗用的白油，目前國(guó)產(chǎn)的有杭州煉油廠生產(chǎn)的10號(hào)白油，國(guó)外產(chǎn)的白油有Drakocel-6VR、Marcol-52和Lipolul-4。在國(guó)內(nèi)制備獸用疫苗尤以Marcol-52常用，其以黏度低、流動(dòng)性好和吸收充分等特點(diǎn)成為目前公認(rèn)的質(zhì)量較好的白油佐劑。在同樣條件下使用進(jìn)口Marcol 52白油乳化的油乳劑疫苗，黏度明顯低于使用國(guó)產(chǎn)10號(hào)白油的黏度，這可能是進(jìn)口Marcol 52白油自身的黏度及紫外吸收值、紫外消光系數(shù)等方面優(yōu)于國(guó)產(chǎn)10號(hào)白油的緣故。

綜上所述，制備品質(zhì)優(yōu)良的油乳劑疫苗，在生產(chǎn)實(shí)踐中應(yīng)綜合考慮以上各個(gè)因素，通過(guò)選擇良好材料和最佳乳劑配方及工藝等，使制備的油乳劑疫苗名副其實(shí)，既有油乳劑疫苗黏性特點(diǎn)，又能發(fā)揮其抗原緩釋作用，延長(zhǎng)其免疫期，采用優(yōu)良的乳化劑還能起到免疫增強(qiáng)作用。